蛋白濃度計(jì)算器是美國(guó)AAT Bioquest設(shè)計(jì)的一種在線即時(shí)濃度計(jì)算工具，以方便研究人員準(zhǔn)確、便捷的進(jìn)行濃度計(jì)算。

如果已經(jīng)知道蛋白分子量和摩爾吸收系數(shù)，可以根據(jù)比爾-朗伯定律，計(jì)算溶液中蛋白的濃度。λ_max 指的是吸收最強(qiáng)值所對(duì)應(yīng)的波數(shù)，對(duì)于蛋白來(lái)說(shuō)，最大吸收波數(shù)一般使用 280 nm。最大吸收波長(zhǎng)處的吸光率可以通過(guò)分光光度儀來(lái)測(cè)量，在測(cè)定蛋白的吸收光譜時(shí)需注意以下幾項(xiàng)：

1. 蛋白需要溶解完全，任何蛋白的沉淀會(huì)給濃度的測(cè)量和計(jì)算帶來(lái)偏差。

2. 吸光度的讀數(shù)不應(yīng)該超過(guò)儀器的量程，導(dǎo)致吸收曲線出現(xiàn)平臺(tái)。如果出現(xiàn)這種情況，應(yīng)該稀釋蛋白溶液再進(jìn)行測(cè)量。

3. 此蛋白濃度計(jì)算式是采用 1cm 標(biāo)準(zhǔn)光程作為基準(zhǔn)，應(yīng)使用 1cm 寬的石英比色皿，如果使用其它尺寸的分光皿，所測(cè)的值應(yīng)予校正。

蛋白濃度計(jì)算原理

示意圖

注：濃度計(jì)算所需的所有數(shù)據(jù)均根據(jù)實(shí)際實(shí)驗(yàn)及所選蛋白進(jìn)行調(diào)整（消光系數(shù)及分子量會(huì)根據(jù)您在計(jì)算工具中的蛋白選擇而自行調(diào)整）。計(jì)算工具鏈接：https://www.aatbio.com/tools/calculate-protein-concentration

操作步驟

1.選擇所要分析的蛋白，如果不是選項(xiàng)中的蛋白，請(qǐng)選擇 "custom sequence"，然后輸入蛋白氨基酸序列。

2.輸入最大吸收的波長(zhǎng)。蛋白一般最大吸收在 280 nm。但是，不同蛋白有不同的最大吸收波長(zhǎng)，請(qǐng)按儀器所測(cè)的最大吸收波

長(zhǎng)為準(zhǔn)，輸入最大吸收峰處的波數(shù)。

3.如果測(cè)量使用的蛋白溶液是已稀釋的溶液，請(qǐng)輸入稀釋的倍數(shù)，用以計(jì)算蛋白的原始濃度。

4.如果所使用的比色皿的光程不是 1cm，請(qǐng)輸入正確的光程。

5.點(diǎn)擊 "計(jì)算" 后即可顯示蛋白濃度。